本篇教你間充質干細胞培養基該如何制備
更新時間：2023-05-24 點擊次數：995次
間充質干細胞(MSCs)是一類具有自我更新和多向分化潛能的細胞，可用于許多治療領域。為了研究和應用這些細胞，需要制備一種適合它們生長和增殖的培養基。以下是制備間充質干細胞培養基的步驟。
1.培養基配方的確定
間充質干細胞培養基的組成包括基礎培養液和補充物兩部分?；A培養液可以選擇DMEM/F12、MEM或α-MEM等，其中含有必要的營養物質和緩沖劑，可以維持MSCs的基本生長需求。補充物可根據不同研究目的進行調整，常見的有10%胎牛血清(FBS)、5-20 ng/ml的人重組FGF、L-抗壞血酸酸鈉(Vc)、牛血清白蛋白(BSA)等。在補充物選擇上，注意避開對細胞有毒的成分。
2.消毒操作
將所有耗材(瓶蓋、吸頭、移液管等)在121℃高壓蒸汽下滅菌30min以上，同時將操作臺面、手套、藥品瓶口用70%乙醇擦拭，避免細菌污染。
3.基礎培養液的配制
按照培養基配方的要求稱量并加入適量的無菌純水，混合均勻后用0.22um濾器過濾滅菌。
4.補充物的添加
將經過消毒和質檢的補充物根據所需比例加入到基礎培養液中，同時通過濾器再次過濾消毒。
5.調節pH值
用NaOH或HCl等調節劑將培養基的pH值調至7.2-7.4，以確保MSCs在正常生理范圍內生長。
6.分裝與保存
將制作好的間充質干細胞培養基分裝到無菌試管或瓶中，密封好后存放于-20℃冰箱中保存。使用前需要先解凍并加入適當的抗生素防止細菌污染。
總之，制備間充質干細胞培養基需要嚴格遵守消毒操作和培養基配方的要求，以確保培養基質量的穩定和可靠性。
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